Aquisição de matérias-primas virais

Triagem de dietas artificiais internas

Com base nos hábitos alimentares de Helicoverpa armigera, são selecionadas 3 a 5 formulações de dieta artificial. Após a otimização, a formulação que suporta criação contínua e alta capacidade de postura é selecionada para produção.

Criação indoor de Helicoverpa armigera

As lagartas do algodão capturadas na natureza são domesticadas através de um regime de substituição gradual de alimentação: ração vegetal pura → ração mista vegetal e artificial → ração artificial completa, para estabelecer uma cepa de laboratório para criação em massa.

Inoculação Viral

Quando aproximadamente 80% das larvas atingem o 3º ínstar, sementes virais purificadas (livres de bactérias diversas) são diluídas em uma suspensão viral com concentração de 1,0×10⁴ a 1,0×10⁷ PIB/mL, que é misturada à dieta para alimentação larval.

Coleta de larvas mortas doentes

A observação começa 3 dias após a alimentação da dieta contaminada com vírus. Larvas mortas e moribundas com corpos inchados e abdômen avermelhado são coletadas duas vezes ao dia (manhã e noite) até a coleta ser concluída.

Extração e Preservação de Vírus

Uma quantidade apropriada de água deionizada é adicionada aos cadáveres de larvas e a mistura é transformada em pasta usando um homogeneizador multifuncional. A moagem é encerrada quando o tamanho da partícula atende às especificações.

Detecção e contagem

A identificação e a contagem quantitativa são realizadas utilizando um microscópio eletrônico e um microscópio óptico, respectivamente. A subembalagem é realizada após aprovação na inspeção.

Armazenamento de vírus

As suspensões de vírus qualificadas são colocadas em tambores plásticos selados e armazenadas em um armazém frio entre -10°C e -20°C para uso posterior.